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Acroedge 熒光強度計 Curea TypeA 技術(shù)介紹

更新時間:2025-11-07      瀏覽次數(shù):44

在生物化學、分子生物學和臨床診斷等領(lǐng)域,對熒光物質(zhì)的精確定量分析是一項重要的實驗需求。熒光強度計作為專門用于測量溶液或樣品中熒光信號強度的儀器,為科研和檢測工作提供了關(guān)鍵的技術(shù)支持。日本Acroedge公司開發(fā)的Curea TypeA熒光強度計是該類儀器中的一個具體型號。本文將圍繞該儀器的基本原理、系統(tǒng)組成、性能特點、應(yīng)用范圍及操作維護要求進行客觀闡述。

一、 儀器定位與基本原理

Curea TypeA熒光強度計是一種設(shè)計用于實驗室環(huán)境的臺式或便攜式分析儀器。其核心功能是精確測量樣品在特定波長光線激發(fā)下所發(fā)射出的熒光強度,從而對樣品中熒光物質(zhì)的濃度或活性進行定量或半定量分析。

該儀器的工作原理基于物質(zhì)的熒光特性。當特定波長(激發(fā)光)的光子照射到熒光物質(zhì)上時,其分子會吸收光能并躍遷至激發(fā)態(tài)。處于不穩(wěn)定激發(fā)態(tài)的分子在返回基態(tài)時,會以光子的形式釋放部分能量,這個過程發(fā)射出的光即為熒光。熒光通常具有比激發(fā)光更長的波長(斯托克斯位移)。

儀器的工作流程如下:

  1. 激發(fā): 儀器內(nèi)部的光源(如氙燈、LED或激光二極管)產(chǎn)生一束特定波長的激發(fā)光。

  2. 分光: 激發(fā)光通過一個激發(fā)濾光片或單色器,篩選出目標波長范圍的光線,使其精確照射到樣品上。

  3. 發(fā)射: 樣品中的熒光物質(zhì)被激發(fā)后,向各個方向發(fā)射出波長更長的熒光。

  4. 探測: 在與激發(fā)光路成一定角度(通常是90°以避免激發(fā)光干擾)的方向上,儀器使用一個探測器(如光電倍增管或光電二極管)來接收熒光信號。

  5. 二次分光與轉(zhuǎn)換: 發(fā)射出的熒光首先通過一個發(fā)射濾光片或單色器,以濾除雜散光和散射的激發(fā)光,只讓目標熒光通過。純凈的熒光信號隨后被探測器捕獲并轉(zhuǎn)換為電信號。

  6. 信號處理與輸出: 電信號經(jīng)過放大、數(shù)字化處理后,由儀器的微處理器進行計算,最終以熒光強度值(通常為相對熒光單位,RFU)的形式顯示在屏幕上或輸出至計算機。

二、 系統(tǒng)組成與結(jié)構(gòu)特點

Curea TypeA熒光強度計通常由以下幾個核心子系統(tǒng)構(gòu)成:

  1. 光學系統(tǒng):

    • 光源: 提供穩(wěn)定的激發(fā)光。其類型和壽命是影響儀器性能的因素之一。

    • 濾光片/單色器: 用于選擇特定的激發(fā)和發(fā)射波長。濾光片型儀器通常配備固定波長的濾光片輪,而配置單色器的儀器則允許波長連續(xù)可調(diào),靈活性更高。

    • 樣品室: 一個用于放置樣品杯或比色皿的暗室,其光路設(shè)計旨在最的大的化熒光收集效率并最小化背景干擾。

    • 探測器: 負責將微弱的熒光信號轉(zhuǎn)換為電信號。

  2. 電子與信號處理系統(tǒng):

    • 包括高壓電源(為光電倍增管等供電)、信號放大器、模數(shù)轉(zhuǎn)換器以及主控電路板。

    • 該系統(tǒng)負責控制儀器操作、處理數(shù)據(jù)和管理用戶界面。

  3. 樣品承載系統(tǒng):

    • 根據(jù)設(shè)計,可能是手動放置單個樣品杯的樣品槽,也可能是適配多孔板(如96孔板)的自動進樣器。這決定了儀器的通量和操作模式。

  4. 用戶界面與數(shù)據(jù)輸出:

    • 通常包括一個液晶顯示屏和物理按鍵或觸摸屏,用于設(shè)置參數(shù)、啟動測量和查看結(jié)果。

    • 配備標準數(shù)據(jù)接口,如USB或RS-232,用于將數(shù)據(jù)導出至計算機或連接打印機。

  5. 外殼與結(jié)構(gòu):

    • 儀器外殼為內(nèi)部精密組件提供物理保護和光密封,以避免環(huán)境光干擾測量。

三、 主要性能特點與技術(shù)參數(shù)

基于熒光強度計的通用技術(shù)規(guī)格,Curea TypeA可能具備以下性能特點:

  • 波長選擇: 其激發(fā)和發(fā)射波長范圍及選擇方式是關(guān)鍵參數(shù)。用戶需確認其波長配置是否適用于目標熒光染料(如FITC、TRITC、Cy系列染料等)。

  • 檢測靈敏度: 通常以純水的拉曼峰信噪比或能夠檢測到的最的低染料濃度來表示。高靈敏度有助于檢測低濃度樣品。

  • 動態(tài)范圍: 指儀器能夠準確測量的熒光強度從最的低到最高的范圍。寬動態(tài)范圍允許在較廣的濃度區(qū)間內(nèi)進行定量,而無需過度稀釋樣品。

  • 測量速度與通量: 對于適配多孔板的型號,其讀取一塊板所需的時間是衡量工作效率的一個指標。

  • 穩(wěn)定性: 儀器讀數(shù)的長期穩(wěn)定性對于獲得可靠數(shù)據(jù)具有重要意義,這與光源的穩(wěn)定性和電路設(shè)計有關(guān)。

  • 用戶校準功能: 儀器可能提供用戶自校準程序,使用標準熒光物質(zhì)來驗證或校準儀器的響應(yīng),以確保測量的一致性。

四、 典型應(yīng)用領(lǐng)域

Curea TypeA熒光強度計可應(yīng)用于多種需要熒光檢測的科研與檢測場景:

  • 分子生物學研究:

    • 核酸定量: 使用熒光染料如SYBR Green I、PicoGreen等對DNA/RNA進行定量分析。

    • 蛋白定量: 應(yīng)用Bradford法、BCA法等基于熒光反應(yīng)的蛋白質(zhì)濃度測定。

  • 細胞生物學研究:

    • 細胞活性與增殖檢測: 如MTT、CCK-8等檢測,其中產(chǎn)生的甲臜等物質(zhì)具有熒光特性。

    • 細胞內(nèi)鈣離子、pH值等指標的檢測: 使用相應(yīng)的熒光探針。

  • 臨床診斷與免疫學:

    • 酶聯(lián)免疫吸附試驗: 在熒光ELISA中讀取熒光信號。

    • 自身抗體篩查等特定指標的檢測。

  • 環(huán)境監(jiān)測與食品科學: 用于檢測水樣或食品提取物中的特定污染物或成分。

五、 操作、校準與維護要點

規(guī)范的操作與維護是保證數(shù)據(jù)質(zhì)量和儀器壽命的基礎(chǔ)。

  1. 操作流程:

    • 開機預熱: 按照操作手冊要求,開啟電源并等待光源和電子系統(tǒng)穩(wěn)定,通常需要一定時間的預熱。

    • 參數(shù)設(shè)置: 根據(jù)實驗方案,在儀器上或配套軟件上設(shè)置正確的激發(fā)波長、發(fā)射波長、增益、測量時間等參數(shù)。

    • 空白校正: 使用與樣品相同但不含熒光物質(zhì)的溶劑(空白溶液)進行測量,并將此值作為背景扣除,以確保讀數(shù)的準確性。

    • 樣品測量: 將待測樣品放入樣品室,啟動測量。確保樣品杯清潔、無劃痕,且每次放置方向一致。

    • 數(shù)據(jù)記錄與分析: 記錄熒光強度值,并根據(jù)標準曲線計算待測物濃度。

  2. 校準與驗證:

    • 定期使用儀器推薦的標準熒光物質(zhì)(如硫酸奎寧、熒光素等)對儀器的靈敏度和線性進行驗證。

    • 如果發(fā)現(xiàn)讀數(shù)漂移或與預期不符,應(yīng)按照操作手冊執(zhí)行校準程序。對于光學系統(tǒng)的重大調(diào)整,建議聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員。

  3. 日常維護:

    • 清潔: 定期用軟布清潔樣品室,防止灰塵或樣品殘留物影響光路。避免使用腐蝕性溶劑擦拭儀器外殼和光學窗口。

    • 光源管理: 注意光源的預計使用壽命。超過使用壽命后,光源亮度可能下降,影響檢測靈敏度,需按規(guī)程更換。

    • 存放: 儀器應(yīng)放置在干燥、清潔、穩(wěn)固的實驗臺上,避免震動和陽光直射。

    • 防潮: 在潮濕環(huán)境中長期不使用時,建議采取防潮措施。

結(jié)論

Acroedge Curea TypeA熒光強度計是一種基于光致發(fā)光原理的實驗室分析儀器。它通過精確控制激發(fā)與發(fā)射波長,并檢測微弱的熒光信號,實現(xiàn)對樣品中特定組分的定量分析。該儀器的性能取決于其光學設(shè)計、探測器靈敏度及信號處理能力。


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